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如何快速高效提取植物蛋白?

蛋白質純化是從細胞、組織或整個生物體中分離出一種或幾種蛋白質。蛋白質純化對于表征目的蛋白質功能、結構和相互作用至關重要。蛋白質分離與提取是生命科學研究基礎由于植物細胞存在細胞壁的結構,因此比動物細胞蛋白的提取相對復雜常見的植物蛋白提取方法主要有三氯乙酸-丙酮法和苯酚-丙酮法,兩種方法的基本原理和基本過程大致類似,優點是過程簡單耗時短缺點則是存在蛋白得率低和雜質較多的問題。

西美杰代理的專業植物學品牌Agrisera為廣大植物學客戶推薦植物蛋白提取緩沖液Protein Extraction Buffer(PEB)——一種通用型提取緩沖液,可以用于提取植物組織(根、葉)和藻類細胞的總蛋白。與傳統提取方法相比,該緩沖液含有陰離子洗滌劑LDS,在與超聲處理和凍融循環組合使用時,可以增加溶解的蛋白含量以及未降解蛋白的含量。

  • 產品信息如下:

貨號

品名

產品說明

AS08 300

1 | PEB (4x) | protein extraction buffer

詳情



 

 

  • 產品優勢:


  1. 可以減少蛋白質降解和聚集
  2. PEB已經在多種高等植物以及苔蘚、地衣、海藻、硅藻、甲藻和藍藻中進行過測試。
  3.  取回收總蛋白含量高達5-6μg/μl。



  • 使用量:

對于高等植物,100g新鮮植物組織樣本使用500ul 1XPEB;

對于藻類樣品,每4-10ug總葉綠素使用200ul 1XPEB

  • 緩沖液組分

4XPEB:40% v/v 甘油;Tris-HCL(PH8.5);LDS;EDTA

  • 注意事項


  1. 將4XPEB原液用無菌去離子水稀釋4倍制備成新鮮的1XPEB使用
  2. 現配現用,以提高提取物中未降解蛋白質的產量
  3. 1XPEB的PH 8.25-8.75
  4. 制備新鮮1XPEB時,建議加入蛋白酶抑制劑
  5. 樣品體積維持在2-0.5ml為宜
  6. 適用于少量珍惜樣本的高效蛋白質提取



  • 操作流程

點擊鏈接獲?。?/span>AS08 300 (agrisera.com)

  • 已發表文獻:

[1] Altuntas et al. (2020). Proline-stimulated signaling primarily targets the chlorophyll degradation pathway and photosynthesis associated processes to cope with short-term water deficit in maize. Photosynth Res. 2020 Apr;144(1):35-48. doi: 10.1007/s11120-020-00727-w.

[2] Pérez-López et al. (2020). Transcriptome Analysis Identifies Plasmodiophora brassicae Secondary Infection Effector Candidates. J Eukaryot Microbiol. 2020 Jan 11. doi: 10.1111/jeu.12784.

[3] Morin et al. (2019). Morin et al. (2019). Response of the sea-ice diatom Fragilariopsis cylindrus to simulated polar night darkness and return to light. Limnology and Oceanography. 9999, 2019, 1?¢??20. (sea-ice diatom)

[4] Bausch, A.R., Juhl, A.R., Donaher, N.A. et al. Mar Biol (2019) 166: 80.

[5] Matsuo and Atsumi (2018). Xylosylation of proteins by expression of human xylosyltransferase 2 in plants. J Biosci Bioeng. 2018 Sep;126(3):371-378. doi: 10.1016/j.jbiosc.2018.03.013.

[6] Brouwer et al. (2011) TheImpact ofLightIntensity onShade-InducedLeaf Senescence. Plant Cell Environ. Dec. 15 (ahead of print).

[7] Kosawang et al. (2011) Hydrogen yield from a hydrogenase in Frankia R43 at different levels of the carbon source propionate. Journal of Environmental Management, Jan 26

 

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